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cy染料小動物活體成像操作流程
2017-04-13 吲哚花菁綠(ICG，indocyaninegreen)是經過FDA認證的菁染料，出于安全考慮，后期應用于活體（人、動物、細胞）的染料在結構上都和ICG有相似或相近之處。cy系列染料是Amersham公司（目前為GE公司）zui初開發(fā)的染料體系，它的橋環(huán)由苯并吲哚變?yōu)檫胚岘h(huán)，并在吲哚的苯環(huán)上對稱地引入硫酸根基團，水溶性得到很大改善，分子量降低后對大分子的親和力有所增加。cy系列菁染料多帶有羥基琥珀酰亞胺活性酯(NHSester)、異硫氰酸酯(NCS)等活性基團，可與蛋白質、多肽...
不接觸染料也能進行DNA電泳的分析
2017-02-24 問：您是否為EB有毒，安全染料貴的問題而煩惱？答：試試李記生物的DNA電泳套裝吧!圖1：I、Hela細胞與EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed在室溫下孵育一小時，用Olympus熒光顯微鏡觀察并拍照，與EB孵育的細胞顯示出綠色熒光，表明染料已透過細胞膜進入細胞并與核酸結合。李記套裝的上樣buffer及李記GelRed未顯示熒光，說明李記染料未能透過細胞膜進入細胞。II、EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed染料相同DNA濃度下染色效果。李記生物的DN...
細胞凍存和復蘇經驗總結
2016-11-29 細胞凍存過程對保持細胞狀態(tài)影響巨大，李記生物結合多年實踐，總結出如下實用的細胞凍存流程。“慢凍快融”是細胞凍存及復蘇的基本原則，這對zui大限度的保存細胞活力至關重要。目前細胞凍存多用甘油或二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性；細胞凍存和復蘇時，減少細胞內冰晶產生是關鍵。緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞外結晶在很短的時間內融化，避免由于緩慢融化使水分滲...
高分辨率熔解曲線（HRM）分析指南
2016-10-10 HRM(HighResolutionMeltinganalysis，高分辨熔解曲線)同許多熒光PCR技術一樣，是利用特定dsDNA染料可以插入DNA雙鏈小溝中（PCR產物）的特性，通過實時監(jiān)測升溫過程中dsDNA解鏈，熒光染料脫落，熒光信號減弱或消失的過程，高分辨記錄熔解曲線，從而對樣品進行檢測。HRM技術利用dsDNA的物理性質，準確反映DNA序列堿基配對特異性與解鏈溫度變化的情況，無需使用特異性標記探針，不受突變種類和突變位點的限制，具有高靈敏度和特異性、高通量、操作簡單...
培養(yǎng)細胞如何選擇適合自己實驗的血清？快點擊進來看看吧！
2016-09-02 培養(yǎng)細胞如何選擇適合自己實驗的血清？快點擊進來看看吧！血清（Serum）即血液凝固析出的淡黃色透明液體將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿zui大的區(qū)別。在凝血反應中，血小板釋放出許多物質，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應...
細胞骨架的熒光探針標記方法
2016-08-11 細胞骨架主要有微管(micmtuble,MT)，微絲(microfilament,MF)，中間絲(intermediatefilament,IF三種類型。它們分別由不同的蛋白單體組裝而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌動蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是細胞骨架的重要組成部分，也是zui常被研究的細胞骨架蛋白。1963年.Slauterback采用戊二醛常溫固定方法.首先使用電鏡在水螅刺細胞中發(fā)現(xiàn)了微管。隨后，微絲和中間絲相繼被發(fā)現(xiàn)。它們廣泛存在于真核細...
細胞培養(yǎng)支原體污染來源/檢測/預防/去除
2016-07-18 細胞培養(yǎng)支原體污染來源/檢測/預防/去除一、細胞培養(yǎng)支原體污染來源及主要支原體種類支原體（Mycoplasma）是一種大小介于細菌和病毒之間（0.1-0.6μm），沒有細胞壁、并獨立生活原核生物，形態(tài)呈高度多形性，呈圓形、絲狀或梨形。由于支原體直徑較小，進行除菌過濾是，約1%的支原體可以直接穿過常規(guī)的0.22μm的微孔除菌濾膜，造成細胞的支原體污染。支原體污染的來源包括：（1）工作環(huán)境的污染，實驗器材帶來的污染；（2）操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）；（3）已受...

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